本发明涉及从茶叶中提取生物碱、儿茶素的方法，属于分离提取领域。本发明所解决的技术间题是提供了一种无有毒有机溶剂残留的从茶叶中提取分离生物碱和儿茶素的方法。本发明从茶叶中提取生物碱和儿茶素的方法包括如下步骤：a、原料前处理：采用水或乙醇溶液提取茶叶，然后过滤，滤液浓缩；b、凝胶层析分离：浓缩后的滤液上样到凝胶层析柱，然后用水洗脱，收集0.8～2BV的洗脱液，洗脱液经干燥得到生物碱；其中，所述凝胶过滤层析所用的填料为葡聚糖凝胶LH-20或交联葡聚糖琼脂糖凝胶；c、儿茶素分离：b步骤用水洗脱生物碱后，用1～2BV的乙醇溶液反冲层析柱，收集乙醇溶液，浓缩干燥得儿茶素。