经过多年技术攻关,我院生物研究所研制完成“致泻大肠埃希氏菌质粒DNA系列标准物质”和“动物源性基因组DNA系列标准物质”共计13种生物领域国家标准物质,并取得国家二级标准物质定级证书。该系列标准物质可用于生物测量量值溯源、定性定量检测、实验室质量控制和人员考核等,为我国食品安全检验检测和风险监测提供了有力的技术支撑。
致泻大肠埃希氏菌主要指一类能引起人体以腹泻症状为主的大肠埃希氏菌。生物所针对致泻大肠检验用标准物质匮乏的问题,攻关研制了志贺毒素Ⅱ基因(stx2)、蛋白分泌物调节基因(escV)、热不稳定性肠毒素基因(lt)、集聚黏附菌毛调节基因(aggR)、集聚热稳定性毒素A基因(astA)、肠定植因子基因(pic)等6种常见毒力基因标准物质。该系列标准物质可在-20℃存储条件下稳定24个月,主要配套国家标准GB 4789.6-2016《食品安全国家标准 食品微生物学检验 致泻大肠埃希氏菌检验》使用。
肉类源性成分鉴别已成为世界各国关注度较高的热点问题。生物研究所针对动物源标准物质的研发相对滞后,无法满足动物源检验检测需求的难题,攻关研制了猪源性ATP8基因、鸭源性cytb基因、绵羊源性cytb基因、牦牛源性cytb基因、鸡源性ND1基因、黄牛源性cytb基因、鹅源性16S rRNA基因等7种动物源性标准物质。该系列标准物质同样可在-20℃存储条件下稳定24个月,主要配套GB/T 21101-2007《动物源性饲料中猪源性成分定性检测方法 PCR法》、GB/T 25165-2010《明胶中牛、羊、猪源性成分的定性检测方法 实时荧光PCR法》、GB/T 38164-2019《常见畜禽动物源性检测 实时荧光PCR法》、SN/T 2557-2010《畜肉食品中牛成分定性检测方法 实时荧光PCR法》、SN/T 3730《食品及饲料中常见畜类品种的鉴定方法》、NY/T 1946-2010《饲料中牛羊源性成分检测 实时荧光聚合酶链反应法》等系列标准使用。
表1. 13种生物领域国家标准物质信息一览表
标准物质名称 | 标准物质编号 | 基因拷贝数浓度(copies/μL) | 扩展不确定度(copies/μL,k=2) |
肠道集聚性大肠埃希氏菌毒力基因aggR质粒 DNA标准物质 | GBW(E)091282 | 2.13×107 | 0.33×107 |
肠道集聚性大肠埃希氏菌毒力基因pic质粒 DNA标准物质 | GBW(E)091283 | 2.35×107 | 0.37×107 |
肠道集聚性大肠埃希氏菌毒力基因astA质粒 DNA标准物质 | GBW(E)091284 | 2.29×107 | 0.36×107 |
产肠毒素大肠埃希氏菌 lt基因质粒DNA 标准物质 | GBW(E)091285 | 2.10×107 | 0.33×107 |
肠道致病性大肠埃希氏菌escV基因质粒DNA 标准物质 | GBW(E)091286 | 2.10×107 | 0.33×107 |
产志贺毒素大肠埃希氏菌stx2基因质粒DNA 标准物质 | GBW(E)091287 | 2.07×107 | 0.32×107 |
猪源性ATP8基因DNA标准物质 | GBW(E)091288 | 1.37×108 | 0.22×108 |
黄牛源性cytb基因DNA标准物质 | GBW(E)091289 | 1.55×107 | 0.24×107 |
牦牛源性cytb基因DNA标准物质 | GBW(E)091290 | 1.26×107 | 0.19×107 |
绵羊源性cytb基因DNA标准物质 | GBW(E)091291 | 2.49×107 | 0.38×107 |
鸡源性ND1基因DNA标准物质 | GBW(E)091292 | 6.62×107 | 1.05×107 |
鸭源性cytb基因DNA标准物质 | GBW(E)091293 | 3.15×107 | 0.48×107 |
鹅源性16S rRNA基因DNA标准物质 | GBW(E)091294 | 5.17×107 | 0.80×107 |